Salut jeune fillotte ! :-)

Je relève ce post pour savoir si tu as testé le DMSO et le glycerol à 4-8-10% sur des congélations à -20°C (congélateur) pour des espèces unicellelulaires.


Alors ????



Je t'avoue que je n'y crois qu'à moitié, mais l'important est de reprendre ta souche cryoconservée dans un gros volume (5-10 ml dans 1 litre final) pour éviter les problèmes de toxicités à long terme de ces composants (avec des repiquages sévères en suivant).

Oups, si tu commences, congèle ta souche doucement dans une boite en polystyrène et décongèle rapidement (frottis entre tes mains) avant la re-mise en route.

J'avoue, j'ai pas eu le temps je suis aussi secretaire d'une association qui dans les prochains mois organise (3 sorties, 2 preparations en restaurantions (journee de la femme et une fete municipale) et 1 grosse bourse de vetements pour enfants).

Je m'y colle cette apres-midi promis, car demain je vais a la bourse aquariophile de Vilette sur ain dans le 01.

J'ai recupere du polystyrene, je pense entourer ma bouteille de journal puis du polisytyrene avant de la mettre au congelateur.

Ok, pour les dilution

Il faudra le concentrer.

Bonjour,

J'ai trouver au fond de mon placard une fiole de 100ml

Pour les dilution en DMSO j'ai mis 4ml (pareil avec 8ml, mais je m'avais pas asser pour la dilution a 10%) puis j'ai complete a 100ml brasser en fermant avec un film plastique puis mis en petite bouteille.

Pour le glycerole j'ai diluee 2, 3, 4ml

J'ai mis les bouteille debout fermer par un film dans du journal environ 3cm d'epaisseur dans la boite de polystyrene, j'ai baisser la temperature du congelateur de -18°C a -20°C. Puis au bout de 24h j'ai sortie les bouteilles de la boite et du journal fermer avec un bouchon a vise et remis de suite au congelateur la remise en culture cet ete.


La suite dans quelques mois

Salut Sylvie, ne pourrais-tu pas décongeler une souche pour voir si cela fonctionne dans un congélateur traditionnel ? :-)

Aucun probleme laquel t'intersses ?

Glycerole ou DMSO

Les deux (je suis un peu à la bourre sur le post). As-tu des résultats mon capitaine ???? :-)


Il me tarde de connaître le verdict à -20°C........

J'avoue etre aussi a la bourre , je decongele les 2 demain
La suite dans quelques jours

Pour clore le post voici la photo des cultures apres decongelation.

Il faut donc un bon -80°C avec d'autres composants (tu peux tester 10% DMSO en milieu nutritif pour voir..... Si tu as le temps.) Merci :-)

Je n'ai plus de DMSO j'avais tout utilise

avez vous essayer avec des concentrations beaucoup plus importante en glycerol ? voir jusqu'à 50 % cette méthode est parfois utilisé pour des bactéries mais j'ai toujours utilisé un -80°C.

-40 c'est possible en surgélation pour un amateur mais moins 80 c'est réservé aux labo.